缓冲液的配制过程中应注意哪些问题(各种缓冲液的配制方法)

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　　hepes缓冲液的配制方法是：准确称取HEPES 2.383g，加入新鲜三蒸水定容至1L。过滤除菌，分装后4℃保存（用于加入细胞培养液中作缓冲剂时，培养液需要避光保存）。Hepes缓冲液的用途：对细胞无毒性作用。Hepes缓冲液是一种氢离子缓冲剂，能较长时间控制恒定的pH范围。使用终浓度为10-50mmol/L，培养液内含20mmol/LHEPES即可达到缓冲能力。

　　配制方法如下：

　　1、500ml 1 M Hepes，pH=7.0 Stock solution的配制。

　　119.15 g Hepes溶解在400ml蒸馏水中，加0.5~1M的NaOH水溶液调节至所需pH（Hepes的有效pH范围是6.8~8.2），然后用蒸馏水定容至500ml，于4摄氏度保存。

　　2、加少量盐的HEPES Buffer配方（500ml）。

　　HEPES 6.5g、NaCl 8.0g、Na2HPO4.7H2O 0.198g、用0.5M NaOH水溶液调节pH值，最后定容。

　　3、2×Hepes缓冲盐溶液的配制。

　　将1.6g NaCl、0.074g KCl、0.027g Na2HPO4、2H2O、0.2g葡聚糖(glucan or dextran)和1g Hepes溶解在90ml的蒸馏水，用0.5M NaOH调节至所需pH值，再用蒸馏水定容至100ml即可。

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